Фибрин с лейкоцитами что это
Гинекологический мазок «на флору»: на что смотреть, и как понять
Большинству женщин мазок «на флору» знаком, как самый «простой» гинекологический анализ. Однако исследование куда «полезнее», чем может казаться. И всего несколько (а то и одно) отклонений способны подсветить значимые проблемы, еще до появления каких-либо симптомов. Так как же понять полученные результаты? Рассказываем по пунктам.
1. Эпителий
Как известно, любой живой объект в природе имеет ограниченный срок жизни, по истечении которого он погибает «от старости».
Эпителий в гинекологическом мазке – это и есть слущенные «старые» клетки слизистой оболочки влагалища, цервикального или уретры (в зависимости от оцениваемого локуса). Которые могут присутствовать в материале в умеренных количествах.
Превышение нормативных пределов («много» или «обильно») может указывать на:
Уменьшение или отсутствие эпителия в мазке – на атрофические изменения, недостаток эстрадиола или избыток андрогенов.
Кроме того, ввиду зависимости эпителия от уровня половых гормонов, его количество в материале может сильно меняться в зависимости от дня цикла, начиная с единичного «в поле зрения» в самом начале – до умеренного и даже большого количества ближе к овуляции и во время нее.
А появление в мазке так называемых «ключевых клеток» (эпителий, «облепленный» мелкими кокковыми бактериями) – является маркером бактериального вагиноза.
2. Лейкоциты
«Норма» лейкоцитов в мазке также сильно зависит от стадии цикла и уровня половых гормонов, а также исследуемого локуса.
Так, за «максимум» для:
Повышение показателя – очевидно, свидетельствует о воспалении, а полное отсутствие может иметь место в норме в самом начале цикла.
Слизь
Результат «отсутствует», «мало» или «умеренно» для этого показателя является нормой, что тоже связано с индивидуальными особенностями гормонального фона и циклом.
А вот «много» слизи в мазке – может свидетельствовать о том, что мазок взят в середине цикла, дисбиотических изменениях или избытке эстрогенов. Поэтому требует внимания специалиста или, как минимум, контроля в динамике.
Флора
Преобладающей флорой женских половых путей в норме у женщин репродуктивного возраста, как известно, являются лактобактерии (или палочки Дедерлейна). Количество которых может быть от умеренного до обильного, в том зависимости, в том числе, от фазы менструального цикла.
Патологические элементы
Присутствия мицелия грибов, трихомонад, диплококков (в том числе и возбудитель гонореи), лептотрикса, мобилункуса и прочих патогенных микроорганизмов в нормальном мазке не допускается, даже в минимальном количестве. А их выявление – серьезный повод незамедлительно обратиться за лечением.
Коагулограмма: все, что нужно знать о свертывании
Свертывание крови – процесс многоступенчатый, сложный и, при этом, чувствительный к действию целого ряда факторов. При этом симптомы «неполадок», как правило, долго не дают о себе знать. И анализ на свертываемость часто выявляет нарушения «случайно». Так кому же следует держать гемостаз «под присмотром»? И как понять показатели тем, кто уже проходит лечение?
Кому показан анализ
Исследование свертываемости крови, в первую очередь, показано тем, кто:
Не стоит исключать из внимания и значимые факторы риска, как курение, лишний вес, малоподвижный образ жизни, возраст старше 40 лет, частые перелеты и другие.
Ну и, конечно же, такой анализ обязателен перед любой операцией, а также для тех, кто уже принимает «противосвертывающие» препараты.
О чем говорят показатели
Набор «стандартной» коагулограммы (50.0.H94.203) включает определение:
Но что означают эти показатели?
1. АЧТВ, или активированное частичное тромбопластиновое время
Оценивает скорость образования сгустка крови после добавления к плазме специальных реагентов, и измеряется в секундах.
Иными словами, АЧТВ демонстрирует эффективность остановки кровотечения за счет плазменных факторов свертывания (как раз тех, что образуются в печени).
При этом, удлинение (повышение) показателя сигнализирует о риске кровотечений, а укорочение – тромбоза.
А особенно «актуален» анализ для людей, принимающих прямые антикоагулянты (гепарин и другие).
2. Протромбиновое время (ПВ)
Это временной отрезок, за который происходит образование нитей фибрина, то есть собственно предшественника тромба.
Показатель измеряется в % от нормы, которая составляет 70-120%.
Чем выше этот показатель – тем выше скорость образования тромба, а значит – и риск тромбоза.
А уменьшение ПВ – сигнал о склонности к кровотечениям.
3. МНО
Такие «сложности» стали необходимостью в связи с тем, что МНО – базовый анализ для подбора и коррекции «противосвертывающих» препаратов (как например, варфарин). А данные, полученные на разной аппаратуре (в разных лабораториях) зачастую не давали возможности сравнения между собой.
Поэтому Международный комитет по стандартизации в гематологии и Международный комитет по тромбозу и гемостазу в 1983 году ввели в использование МНО.
И сегодня, его уровень для здорового человека находится на уровне 0,8-1.2. А для принимающих непрямые антикоагулянты – 2,0-4,0.
При этом, повышение МНО ассоциировано с риском кровотечений, а снижение менее 0,5 – может говорить о тромбозе.
4. Фибриноген
В отличие от предыдущих показателей, это непосредственно субстрат для образования тромба. То есть не показатель скорости, а вещество. Поэтому и нормы для фибриногена измеряются в граммах на литр.
Повышение фибриногена наблюдается не только при повышенном тромбообразовании, но и при многих воспалительных процессах (как способ организма ограничить распространение «причинного фактора» и разрушенных тканей). А также у тех, кто принимает оральные контрацептивы или имеет повышенный уровень эстрогенов, беременных, людей с повышенным холестерином и курящих.
А снижение показателя может говорить не только о риске кровотечений, но и о заболеваниях печени.
Разумеется, перечисленные показатели являются только «базой» для оценки «здоровья» свертывающей системы крови. И в случае обнаружения значимых отклонений могут понадобиться дополнительные маркеры.
Коагулограмма
В системе гемостаза принимают участие факторы свертывающей, противосвертывающей (антикоагулянтной) и фибринолитической систем крови. Изменение функционального состояния одной из систем сопровождается компенсаторными сдвигами в деятельности другой. Нарушение функциональных взаимосвязей может привести к тяжелым патологическим состояниям организма, заключающимся или в повышенной кровоточивости, или во внутрисосудистом тромбообразовании.
Условия сдачи коагулограммы
Не допускается в течение 8 часов (желательно 12) до сдачи анализа прием пищи, в том числе, сок, чай, кофе, алкоголь. Можно пить простую воду. Если врач назначил сдачу анализа на фоне приема препаратов, влияющих на свертывание крови, отметьте это при сдаче анализа.
D-димер (продукт деградации фибрина, D-dimer, Fibrin degradation fragment)
Определение уровня Д-димера является высокоспецифичным и чувствительным маркером тромбообразования. Однако его уровень повышается и при патологических состояниях, сопровождающихся усиленным фибринолизом: геморрагические осложнения, инфекции, заживлении ран, при наличии в крови ревматоидного фактора и т.п. Тем не менее, определение Д-димера имеет важное диагностическое значение в диагностике тромбозов. Нормальный его уровень позволяет с точностью 98% исключить состояния, сопровождающиеся повышенным тромбообразованием.
Антитромбин III (Antithrombin III)
АТ III определяется по ингибированию тромбина. Дефицит AT III может быть наследственным или приобретенным. Наиболее частым клиническим проявлением наследственного дефицита AT III является развитие тромбоза глубоких вен и, как следствие этого, тромбоэмболии легкого. Вероятность развития тромботических осложнений у больных с дефицитом AT III увеличивается с возрастом.
Приобретенный дефицит AT III может быть обусловлен сниженным синтезом, повышенным потреблением или потерей белка. Во всех этих случаях наблюдается параллельное снижение концентрации и активности AT III. AT III синтезируется в печени, поэтому некоторые заболевания печени приводят к снижению уровня AT III. Если параллельно со снижением AT III происходит повышение тромбогенных свойств стенки сосудов и активация свертывания, то наблюдается дальнейшее снижение AT III обусловленное его потреблением, что встречается при ДВС-синдроме, вызванном различной патологией: при массивных травмах, сепсисе, воспалениях ран, змеиных укусах, осложненной беременности, раке и т.д.
Кроме того, снижение синтеза AT III наблюдается при терапии эстрогенами и синтетическими препаратами, обладающими эстрогенным действием, нефротическом синдроме и желудочно-кишечных заболеваниях, когда потеря белка превышает скорость его синтеза. В этих случаях наблюдается параллельное снижение AT III и альбумина.
Тромбиновое время (ТВ)
Дает общую оценку конечного этапа свертывания крови. Это показатель перехода фибриногена в фибрин, состояния антикоагулянтной системы. Не зависит от внутренней и внешней системы активации, но зависит от концентрации фибриногена, наличия аномального фибриногена, активности антитромбинов, процессов полимеризации и стабилизации фибрина.
В клинике определение ТВ используется для контроля за гепаринотерапией (особенно высомолекулярным гепарином) и фибринолитической терапией; для диагностики активации фибринолиза, косвенной диагностики гипо- и дисфибриногенемий.
Этот тест — один из основных для контроля лечения гепарином. У больных, получающих гепаринотерапию, АЧТВ удлиняется в 1,5–2 раза, что свидетельствует об эффективности лечения.
Определение АЧТВ позволяет окончательно решить вопрос о толерантности к гепарину: для этого проводят определение АЧТВ за 1 ч до очередного введения гепарина. Если АЧТВ окажется удлиненным более чем в 2,5 раза по сравнению с нормой, констатируют повышенную чувствительность к гепарину, снижают его дозу или увеличивают интервал между введениями.
Протромбиновое (тромбопластиновое) время (ПВ)
Путем ПВ с вычислением международного нормализованного отношения (МНО) и протромбинового индекса (ПИ) суммарно оценивают внешний механизм. Протромбиновое время зависит от содержания собственно протромбина — фактора II, а также V, VII, X факторов и фибриногена. Используют для диагностики тромбоэмболических и геморрагических состояний, для контроля за лечением антикоагулянтами непрямого действия.
Определение содержания фибриногена
Его концентрация определяется по времени образования сгустка в разведённой бестромбоцитной плазме при добавлении избытка высокоактивного тромбина (по Клауссу). Фибриноген синтезируется в печени, откуда поступает в кровь. Изменение концентрации фибриногена наблюдается при различных заболеваниях — в первую очередь, при нарушениях системы гемостаза и острых воспалениях.
Повышение количества фибриногена даже в пределах нормальных значений рассматривается как фактор риска при сердечно-сосудистых заболеваниях.
Антифосфолипидный синдром (АФЛ)
Это группа заболеваний, вызванных наличием антител к фосфолипидам. Антифосфолипидные антитела (АФЛ) — аутоантитела класса IgG и IgM, способные связываться с антигенными детерминантами фофолипидов- (кардиолипин, фосфатидилсерин, фосфатидилинозитол, фосфатидиловая кислота, фосфатидилхолин) и фосфолипид — связывающих белков. Связывание с кардиолипином происходит при обязательном участии кофактора — рг-гликопротена I.
Причины выработки АФЛ не установлены. Предположительно, длительная персистенция вирусов, тропных к эндотелию сосудов, вызывает: морфологические и функциональные изменения клеток эндотелиальной мембраны с развитием гиперкоагуляционного синдрома, стимуляцию В-лимфоцитов, которые при определенных условиях продуцируют АФЛ.
АФЛ связываются с фосфолипидами клеточных мембран, изменяя конформационную и метаболическую структуру клетки, что приводит к нарушению функции клеток с развитием стаза и тромбоза. В связи с тем, что поражаются сосуды различного калибра и различной локализации, спектр клинических проявлений АФС разнообразен — тромбозы, инсульты, акушерская патология, тромбоцитопении. Частота встречаемости АФЛ при различных патологических состояниях представлена ниже.
Основным критерием лабораторного диагноза АФС является наличие АФЛ (или антител к кардиолипину) и волчаночного антикоагулянта в 2-х или более исследованиях с интервалом не менее 6 недель.
Устаревшие методы исследования нарушений гемостаза и варианты их замены
Фибрин с лейкоцитами что это
Онкологические больные относятся к группе высокого риска по развитию у них тромботических осложнений. Одним из основных методом лечения является проведение лизиса тромбов в сосудах. Однако стандартная тромболитическая терапия не всегда эффективна, что может быть связано с тем, что в сосуде, где располагается тромб или нет кровотока, или же он резко снижен. Поэтому введение фибринолитических агентов в сосудистое русло не может быть достаточно результативным, тромболитик не может достичь тромба. Другим недостатком данного вида терапии является то, что лекарственные препараты приходится вводить в достаточно высоких концентрациях. Причем существенная часть фибринолитика блокируется многочисленными ингибиторами крови, и клиницист не всегда знает уровень этого потенциала. Причем он может существенно отличаться у различных пациентов. Фибринолитическая терапия также может сопровождаться различными осложнениям: кровотечения, развитие инсульта, аллергические реакции и другие [2].
В настоящее время уделяется значительное внимание фибринолизу, осуществляемому белками плазмы крови, однако, по нашему мнению, незаслуженно забыта фибринолитическая активность клеток крови.
В последние годы установлено, что при некоторых патологических состояниях лейкоцитарный фибринолиз играет весьма важную роль. Установлена его ключевая роль в нарушении фибринолиза при сепсисе [6, 9], при вирусной патологии [8], при кардиоваскулярных заболеваниях [10]. Показано также, что внутривенный тромболизис более эффективен при высокой активности и большем количестве нейтрофилов в крови [7]. В других работах установлено, что на фибринолитическую активность нейтрофилов оказывают влияние некоторые пептиды [3, 4].
Цель исследования: изучение нарушений лейкоцитарного фибринолиза у онкологических больных и в дальнейшем профилактика и лечение тромботических осложнений.
Для решения этой цели необходимо выполнить несколько задач: во-первых, дополнительно нагрузить нейтрофилы фибринолитиками для усиления их фибринолитической активности, во-вторых, повысить тропность нейтрофилов к фибрину, и, в-третьих, заставить нейтрофилы выбросить тромболитики в определенном месте при контакте с тромбом. В данной работе мы пытаемся решить лишь несколько из этих задач.
Материал и методы исследования
Исследования проводили на крови 21 здорового донора и 12 онкологических больных с раком желудка после хирургического вмешательства. Во всех экспериментах использовали нейтрофилы, выделенные из венозной гепаринизированной крови по стандартной методике на градиенте плотности фикол-верографин. Для определения фибринолитической активности клеток лейкоцитарную взвесь инкубировали на фибрине, после чего отбирали пробы супернатанта с последующим определением продуктов деградации фибрина иммуноферментным методом. Фибринолитическую активность клеток выражали в мкг продуктов деградации фибрина (ПДФ) в супернатанте [4]. Каждую взвесь нейтрофилов использовали в 4 сериях экспериментов.
Степень адгезии нейтрофилов к поверхности фибринового геля оценивали через 1 час инкубации клеточной суспензии в лунках плоскодонного полистеролового планшета. Накануне эксперимента лунки планшета покрывали слоем фибрина. Для этого в них вносили по 200 мкл смеси 1 % раствора фибриногена человека и раствор тромбина (активность 50 ед./мл) в соотношении 4:1. Сразу же после заполнения лунок содержимое вытряхивали и свертывание оставшегося количества смеси приводило к образованию тонкого слоя фибрина.
После удаления неприлипших клеток лунки отмывали культуральной средой. Затем проводили фиксацию метанолом (10 минут) и окрашивали по Романовскому [5]. Адгезивность клеток определяли при увеличении ×150 раз по их количеству в единице площади окулярной сетки микроскопа в 5 квадратах, установленных методом случайного отбора.
Полученные данные обработаны с помощью пакета статистических программ Statistica, версия 6,0, пакета программ Biostat и Microsoft Excel 2003 с расчетом статистически значимых различий (p).
Результаты исследованияи их обсуждение
На первом этапе мы попытались повысить фибринолитическую активность нейтрофилов. С этой целью мы использовали три группы веществ:
1. Фибринолитические ферменты (стрептаза, урокиназа).
2. Известные стимуляторы лейкоцитов (зимозан, продигиозан).
3. Прочие вещества (конкавалин А, хлористый аммоний).
Наибольшую стимулирующую активность на нейтрофилы оказывали фибринолитические ферменты.
Метод определения фибринолитической активности клеток предложен нами, поэтому вначале необходимо было определить наиболее оптимальные режимы. Нейтрофилы, выделенные из крови здоровых доноров, помещали в среду 199, содержащую стрептазу в различных концентрациях, определяли доза-эффект, а также инкубировали различные промежутки времени для определения время-эффекта. После тщательного отмывания в среде клетки наносили на фибриновые пластины для определения фибринолитической активности клеток. Контролем служили интактные нейтрофилы.
Установлено, что уже на первых минутах контакта клеток с ферментом их способность лизировать фибрин достоверно возрастает (табл. 1). Активация наивысшей степени наблюдается на 10 минуте инкубации. Максимально активирующей выявлена концентрация стрептазы 100 и 200 ед./мл среды.
Таким образом, увеличение тромботической активности нейтрофилов связано с накоплением фибринолитического препарата внутри клеток и сохранением его активности с возможностью дальнейшего выделения в окружающую среду.
Влияние преинкубации со стрептазой на фибринолитическую активность нейтрофилов (М ± m, n = 12)
Мембраны из плазмы крови
Плазма крови пациента достаточно широко используется в медицине. При помощи специального оборудования (центрифуги) кровь делится на фракции или составляющие: непосредственно плазму – жидкость, которая имеет желтоватый цвет и содержит большое количество фибрина; фибриновый сгусток, обогащенный тромбоцитами. И еще одна часть, самая густая – это смесь лейкоцитов и эритроцитов. Именно плазма, а также фибриновый сгусток активно применяются в стоматологии.
Данная технология называется PRF (Platelet Rich Fibrin), что переводится именно как «тромбоцитарный фибрин» или фибрин, обогащенный тромбоцитами. Фибрин – это белок, который отвечает за закупоривание сосудов при повреждении. Тромбоциты – клетки, отвечающие за заживление ран и ускорение роста клеток. Таким образом, мембраны, созданные из плазмы крови пациента с содержанием фибрина и тромбоцитов, позволяют заметно ускорить регенерацию клеток и тканей при различных хирургических вмешательствах.
Эта технология применяется в Европе и США уже более 30 лет. Но в России считается инновационной. Применение плазмы крови – это эффективное дополнение при имплантации, удалении зубов, хирургической пластике десен, а также в совокупности с подсадкой искусственных заменителей костной ткани.
Преимущества использования плазмы крови
Применение PRF-мембран позволяет провести естественную стимуляцию роста клеток челюстной кости или тканей пародонта, что заметно ускоряет процессы их роста. Реабилитация и приживление имплантов или костного материала происходит быстрее, а риски воспалительных процессов значительно снижаются.
Использование плазмы крови положительно влияет на следующие процессы:
«Специалисты нашей клиники в течение многих лет активно используют в работе данную технологию – прошли необходимое обучение и знают гематологию, понимают механизмы свертывания крови. Поэтому трудностей в работе с данным оборудованием у нас не возникает. У каждого человека свои особенности как организма, так и кровеносной системы, поэтому мы используем строго индивидуальный подход даже в таком вопросе, как получение PRF-мембран».
Технология проведения и особенности подготовки
Подготовка к проведению процедуры не имеет каких-то специфических особенностей. Самое главное – исключить накануне жирную и острую пищу, алкоголь. Желательно также хорошо выспаться. Забор крови не проводится на фоне приема антибактериальных препаратов – необходимо дождаться окончания терапии.
Процедура занимает немного времени и проводится следующим образом:
Готовые мембраны хранятся в течение максимум 4 часов, поэтому забор крови и ее обработка проводятся непосредственно в день установки имплантов или проведения других хирургических вмешательств.
Недостатки методики
Методика не имеет недостатков. Единственное, что можно выделить – это увеличение стоимости. Тем не менее, мембраны очень эффективны, делают процесс хирургических вмешательств более комфортным для пациента и снижают риски послеоперационных осложнений. А в ряде ситуаций использование данной технологии обходится даже дешевле, чем проведение классической костной пластики.
При проведении костной пластики с использованием мембран, полученных из плазмы крови, в клинике Smile-at-Once также применяются специальные активаторы роста (PrefGel и Emdogein от компании Straumann), которые обеспечивают очищение полости и дополнительную стимуляцию роста костной и десневой ткани, что необходимо для ускорения процесса приживления имплантатов, особенно при применении методов одноэтапной имплантации с немедленной нагрузкой.
1 Толстов Д.А., Богдан В.Г. Тромбоцитарные концентраты: классификация, технологии получения, биологические эффекты, 2012.