Инфекции органов репродукции
Соответственно, для проведения полного ПЦР-исследования на наличие инфекций органов репродукции требуются следующие реагенты:
Транспортные среды обеспечивают стабильность образцов при транспортировке и хранении биологического материала от мужчин и женщин.
Все транспортные среды АмплиСенс® содержат консервант, препятствующий росту специфической и сторонней микрофлоры, и стабилизатор, предохраняющий клетки человека и бактерий от лизиса и разрушения в процессе хранения и транспортировки.
«Транспортная среда для мазков» предназначена для сбора и транспортировки образцов, содержащих умеренное количество слизи (например, образцов от мужчин).
Любую транспортную среду можно приобрести в готовом к использованию, раскапанном по пробиркам виде или во флаконе для раскапки в любые транспортные пробирки (приобретаются отдельно).
Основные наборы реагентов для экстракции ДНК, которые используются в лаборатории, выполняющей ПЦР-исследования на инфекции органов репродукции:
| Наименование | «ЭДЭМ» | «ДНК-сорб-АМ» | «МАГНО-сорб-УРО» |
| Назначение | экстракция ДНК из соскобного материала и отделяемого слизистых оболочек урогенитального тракта, ротоглотки, конъюнктивы глаз, эрозивно-язвенных элементов слизистых и кожи, образцов мочи | экстракции ДНК из соскобного отделяемого слизистых оболочек урогенитального тракта и образцов мочи | |
| Варианты работы с набором реагентов | ручная экстракция | ручная или автоматическая экстракция | |
| Совместимые комплекты для ПЦР | комплекты для ПЦР в качественном формате | комплекты для ПЦР в качественном и количественном формате | |
| Совместимые транспортные среды | «ТС-ЭДЭМ» (в комплекте) | «Транспортная среда с муколитиком (ТСМ)», «Транспортная среда для мазков», «ТС-ЭДЭМ» | |
| Количество экстракций | 100 | 100 | 100 |
| Объем биоматериала, мкл | 100 | 100 | 100 |
| Каталожный № | К2-17-100 | K1-11-100 | К1-19-100 |
При тестировании методом NASBA для экстракции РНК/ДНК может использоваться автоматическая станция «NucliSENS® easyMAGTM» («bioMérieux», Франция) и соответствующие реагенты и расходные материалы к ней. Метод NASBA – это современный метод диагностики и контроля лечения инфекций, передаваемых половым путем, отличающийся от ПЦР ещё более высокой чувствительностью и большим удобством применения в качестве теста для контроля лечения.
Амплификация и детекция
Современные клинико-диагностические лаборатории используют наборы реагентов для выявления инфекций органов репродукциии с двумя вариантами детекции продуктов амплификации.
Наиболее совершенный формат исследования – это ПЦР в реальном времени (FRT). Высокая скорость выполнения теста, контаминационная защищенность и возможность проведения все более актуальных в практической медицине количественных исследований – всё это привлекает лабораторию в методе ПЦР в реальном времени.
Метод ПЦР с флуоресцентной детекцией по конечной точке (FEP) взял всё лучшее от ПЦР в реальном времени (скорость, безопасность, автоматическое сохранение результатов в электронном виде), но не позволяет проводить количественные исследования.
Исторически первый метод ПЦР с электрофоретической детекцией всё реже используется в клинико-диагностических лабораториях ввиду того, что в меньшей степени подходит для потоковых исследований, требует больше помещений и трудозатрат для выполнения исследований и поддержания контаминационной безопасности.
Краткое сравнение реагентов для амплификации ДНК/РНК по варианту детекции продуктов амплификации
| Вариант детекции продуктов амплификации | ПЦР/NASBA в реальном времени | ПЦР с флуоресцентной детекцией по конечной точке |
| Обозначение | FRT, NASBA | FEP |
| Необходимое оборудование | амплификатор с детекцией в режиме реального времени | амплификатор; флуоресцентный детектор |
| Возможность количественного анализа | есть | нет |
| Количество одновременно выявляемых мишеней | 1. 4 | 1. 3 |
| Возможность полной автоматизации | есть | нет |
Наборы реагентов для выявления отдельных инфекций органов репродукции
АмплиСенс® предлагает широкую линейку наборов реагентов для выявления отдельных инфекций органов репродукции. Это простые и гибкие инструменты, позволяющие организовать поток анализов по потребностям любой лаборатории.
Подробную информацию об этих наборах реагентов можно найти в каталоге:
Диагностика в формате МУЛЬТИПРАЙМ
Наборы реагентов АмплиСенс® МУЛЬТИПРАЙМ идеально подходят для выполнения комплексных исследований на репродуктивно значимые инфекции, позволяя уменьшать количество пробирок, приходящихся на одного пациента, с 6-7 до двух:
Примеры компоновки тестов АмплиСенс® МУЛЬТИПРАЙМ для выполнения комплексных исследований:
Тесты «Флороценоз»: диагностические задачи и выявляемые микроорганизмы
вульвовагинального
кандидоза
ассоциированных с условно патогенными микоплазмами
бактериального
вагиноза
аэробного вагинита
Нормативные документы и публикации>>
Главный офис г. Москва
+7 (495) 664-28-84
Изучение распространенности возбудителей ИППП (C. trachomatis, N. gonorrhoeae, М. genitalium, T. vaginalis) с помощью ПЦР в реальном времени в формате «МУЛЬТИПРАЙМ»
Изучение распространенности возбудителей ИППП (C. trachomatis, N. gonorrhoeae, М. genitalium, T. vaginalis) с помощью ПЦР в реальном времени в формате «МУЛЬТИПРАЙМ»
ФБУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва
Investigation the prevalence of the causative agents of STI (C. trachomatis, N. gonorrhoeae, М. genitalium, T. vaginalis) by real-time PCR using the MULTIPRIME system
A.E. GUSHCHIN, P.G. RYZHIKH, YU.A. SAVOCHKINA, O.YU. SHIPULINA, G.A. SHIPULIN
Federal State Budgetary Institution of Science Central Research Institute of Epidemiology, Russian Federal Consumer Rights Protection and Human Health Control Service, Moscow
Ключевые слова: инфекции, передаваемые половым путем, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma genitalium, полимеразная цепная реакция в реальном времени, формат «МУЛЬТИПРАЙМ».
Key words: sexually transmitted infections, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma genitalium, real-time polymerase chain reaction, MULTIPRIME system.
Инфекционно-воспалительные заболевания урогенитального тракта — одна из основных причин нарушения репродуктивной функции человека. Из многообразия микроорганизмов, способных вызы- вать такие заболевания, в первую очередь следует выделить те, этиологическая роль которых считается доказанной. Речь идет о таких возбудителях, как Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis, относящихся к группе инфекций, передаваемых половым путем (ИППП). В последние годы накопилось большое количество данных, свидетельствующих о самостоятельной этиологической роли Mycoplasma genitalium. В частности, в последних работах C. Gaydos [1, 2] показано, что M. genitalium — вторая по частоте после C. trachomatis причина уретритов у мужчин, а при цервицитах в обследованной группе женщин M. genitalium находилась на первом месте. Долгое время основной причиной воспалительных заболеваний органов малого таза, трубного бесплодия, эпидидимита и орхита считали хламидии и гонококки. В работах последних лет показано, что значительную роль при этих осложнениях играет M. genitalium [3]. В настоящее время этот микроорганизм подавляющее большинство зарубежных специалистов рассматривают как безусловно-патогенный, что обусловливает необходимость включить его в перечень потенциальных этиологических агентов при дифференциальной диагностике ИППП.
В последние годы основу лабораторной диагностики многих стран мира составляют методы амплификации нуклеиновых кислот (МАНК), из которых в нашей стране наиболее известным является метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Принятые недавно Европейские протоколы [4—7] ведения больных с ИППП для обнаружения C. trachomatis, N. gonorrhoeae, M. genitalium и T. vaginalis рекомендуют использовать в лабораторной диагностике современные МАНК.
В ФБУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора разработаны тесты на основе ПЦР для отдельных возбудителей ИППП. Проведен ряд исследований [8—11], результаты которых свидетельствуют о преимуществе аналитических характеристик разработанных ПЦР-тестов над классическими рутинными тестами. Появление современных вариантов МАНК, в частности ПЦР в реальном времени, в сочетании с возможностью использовать современное оборудование позволило одновременно проводить амплификацию и детекцию ДНК нескольких ми- кроорганизмов. Нами разработан тест на основе мультиплексной ПЦР в реальном времени — «АмплиСенс-N. gonorrhoeae/C. trachomatis/M. genitalium/T. vaginalis — МУЛЬТИПРАЙМ-FL» для одновременного выявления четырех наиболее значимых патогенных возбудителей ИППП.
Цель нашего исследования — изучение с помощью разработанного теста распространенности возбудителей ИППП — C. trachomatis, N. gonorrhoeae, M. genitalium, T. vaginalis — среди пациентов медицинских центров Москвы.
Материал и методы
В период с 2010 по 2011 г. в Центр молекулярной диагностики ФБУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора (ЦМД ЦНИИЭ) был направлен клинический материал из разных лечебно-профилактических учреждений (ЛПУ) Москвы для исследова- ния одновременно на четыре возбудителя ИППП — C. trachomatis, N. gonorrhoeae, M. genitalium и T. vaginalis методом ПЦР в реальном времени. Вели прием пациентов и получали клинический материал вра- чи разных специальностей: дерматовенерологи, гинекологи, урологи, а также врачи смежных специальностей, ведущие пациентов с патологией органов репродукции. Клиническим материалом являлись мазок из влагалища, соскоб из цервикального канала.
Молекулярно-биологическое исследование
Из полученных клинических образцов выделяли ДНК с помощью набора ДНК-сорб-АМ. Дальнейшее исследование выделенных препаратов ДНК проводили с использованием набора реагентов для ПЦР в реальном времени «АмплиСенс- N. gonorrhoeae/C. trachomatis/M. genitalium/T. vaginalis — МУЛЬТИПРАЙМ-FL» согласно инструкции. Данный набор реагентов включает пары праймеров и флюоресцентно-меченые гибридизационные зонды, специфичные к ДНК четырех указанных микроорганизмов, а также к ДНК внутреннего контрольного образца. При наличии в пробе ДНК одного или нескольких исследуемых возбудителей происходят амплификация и детекция их специфических фрагментов. ПЦР в реальном времени проводили с помощью приборов Rotor-Gene 6000 (Corbett Research, Австралия) и Rotor-Gene Q (QIAGEN, Германия).
Результаты и обсуждение
Анализ полученных данных показал, что в общей сложности за указанный период с использованием теста «АмплиСенс-N. gonorrhoeae/C. trachomatis/ M. genitalium/T. vaginalis — МУЛЬТИПРАЙМ-FL» были обследованы 8115 пациентов (83,9% женщин, 16,1% мужчин) в возрасте 18—45 лет. Материал был получен в 35 клиниках Москвы. Частота выявления возбудителей значительно варьировала между разными клиниками и находилась в пределах 2,8—24%. Следует отметить, что данные ЛПУ не входят в состав кожно-венерологической службы и являются многопрофильными медицинскими центрами. Результаты анализа распространенности ИППП среди обследованных мужчин и женщин свидетельствуют о том, что доля инфицированных мужчин (11,6%) была выше, чем женщин (6,8%), хотя мужчины составили всего 1/6 всех обследованных. Дальнейший анализ позволил определить соотношение тех или иных возбудителей ИППП среди инфицированных пациентов. Наиболее распространенной среди мужчин и женщин является хламидийная инфекция, доля которой у мужчин по сравнению с другими ИППП в 1,2 раза выше (рис. 1, 2). Второй по частоте встречаемости у лиц обоих полов является инфекция, вызванная M. genitalium, которая у обследованных женщин обнаруживалась 1,5 раза чаще, чем у мужчин. Наибольшими различия между мужчинами и женщинами были по частоте выявления N. gonorrhoeae и T. vaginalis. У женщин T. vaginalis была третьим по частоте возбудителем ИППП, в то время как на третьем месте у мужчин выявлялся возбудитель N. gonorrhoeae.
Примерно в одинаковом долевом соотношении, как у мужчин, так и у женщин, встречались микстинфекции, вызванные данными возбудителями (рис. 3, 4). Однако у женщин зарегистрировано 9 разных комбинаций, включая случаи инфицирования одновременно тремя патогенными возбудителями, тогда как у мужчин зафиксированы 3 варианта сочетания возбудителей. Второй по встречаемости комбинацией возбудителей у женщин была C. trachomatis + T. vaginalis, у мужчин — C. trachomatis + N. gonorrhoeae.
В задачи данного исследования не входил ана- лиз клинического статуса пациентов. На данном этапе исследования нас интересовала феноменология распространенности основных патогенных возбудителей урогенитальных инфекций. Это имеет важное значение, учитывая сложившуюся в нашей стране практику назначения лабораторных исследований. Мы провели анализ назначений на ПЦР- исследования в разных медицинских центрах Москвы, включая те, которые уже упоминались. За 2010 г. в ЦМД ЦНИИЭ были исследованы клинические образцы, полученные от 154 272 пациентов (78,4% женщин, 21,6% мужчин), в которых одним из тестируемых возбудителей была C. trachomatis. Установлено, что в исследованиях на урогенитальные инфекции методом ПЦР основную долю (более 95%) составляют те, в которых, помимо C. trachomatis, тестируются условно-патогенные микроорганизмы, прежде всего M. hominis, Ureaplasma, G. vaginalis, Candida и др. (рис. 5). Мы подчеркиваем, что речь идет о методе ПЦР в качественном формате, основное преимущество которого —высокая чувствительность — является спорным достоинством для диагностики условно-патогенной флоры. И наоборот, доля назначений на исследования, в которых, помимо хламидий, фигурировали бы другие клинически значимые патогенные возбудители, была менее 5%. Такая диспропорция не может не отразиться не только на учете и регистрации случаев заболевания, но и на выборе адекватной тактики лечения. Причины этого имеют как объективный, так и субъективный характер.
Объективными причинами последнего тезиса являются устаревшая и противоречивая норма тив- но-правовая база, отсутствие современных стан- дартов, регламентирующих применение в лабора- торной практике молекулярных методов, в частно- сти ПЦР, в то время как в большинстве развитых стран мира основными методами диагностики ИППП являются молекулярно-биологические. В то же время в нашей стране достаточно давно вы- пускаются коммерческие тест-системы на базе ме- тодов ПЦР и НАСБА, которые прошли процедуру государственной регистрации и разрешены к ис- пользованию в лабораторной практике. К субъек- тивным причинам следует отнести часто необосно- ванное предубеждение клиницистов в отношении молекулярных методов, низкую информирован- ность об их преимуществах.
Мультипрайм исследования
К лабораторным исследованиям относится ПЦР – исследование полисоразмерной цепной реакции, когда в биологическом материале определяют уникальные фрагменты генов, характерные для того или иного возбудителя. Таким способом могут быть выявлены бактерии и вирусы, хорошо известные человеку.
Мультипрайм исследование отличается от обычного ПЦР тем, что биологический материал из одной пробирки исследуется сразу на несколько возбудителей. Это сложнее и занимает больше времени, но зато и результат можно получить сразу по комплексу инфекций.
В каких случаях назначаются мультипрайм-исследования
Часто такая диагностика выполняет роль своего рода скриннинга – врачи назначают анализ в случаях, когда схожие симптомы могут вызывать различные бактерии или вирусы. Он также проводится в профилактических целях и при подготовке к некоторым операциям, беременности или ЭКО. Бывает и так, что пациент проводит такое развернутое исследование по желанию – например, этим методом проводятся тест на распространенные ИППП.
Для материала может использоваться различный биоматериал. Чаще всего это мазки (с половых путей или с горла – зависит от исследования), но бывает и так, что используется моча или кровь.
Как готовиться к исследованию
Уточните при записи или у лечащего врача, какой биологический материал нужен для анализа. Если это кровь или моча – чаще всего специальных мер подготовки нет. Если же врач будет брать мазок, нужно постараться не смывать естественную флору слизистых и по возможности не загрязнять ее чужеродным материалом.
На практике это означает, что если для исследования нужно будет сдать мазок изо рта или с глотки – то не стоит полоскать их антисептическими растворами перед исследованием. Почистить зубы можно и нужно, а вот есть непосредственно перед исследованием не стоит – во рту не должно оставаться частичек пищи. Поешьте заранее и прополощите рот и горло простой водой.
Если потребуется материал для ПЦР из половых путей, нельзя подмываться с мылом или использовать для этого дезинфицирующие растворы. Используйте обычную воду. Также нежелательно вступать в половой контакт в течение суток до исследования.
Результаты мультипрайм-исследования
Обычно результаты исследования выдаются в виде списка, где напротив названия возбудителя указано, обнаружен он в сданном материале или нет.
Мультипрайм-диагностика позволяет обнаружить патогенные организмы следующих групп:
Если вы не хотите тратить на анализы много времени и денег, мультипрайм-исследования – это именно то, что вам нужно!
Лабораторная диагностика инфекций органов репродукции: анализы на урогенитальные инфекции
Урогенитальные инфекции относятся к группе репродуктивно значимых инфекций, и часто становятся причиной бесплодия, нарушения эректильной функции, осложнений беременности и родов, болезней новорожденных, воспалительных заболеваний половых органов.
Развитие клинически выраженного заболевания зависит от состояния иммунной системы, концентрации и вирулентности возбудителя инфекции. Зачастую первые симптомы ИППП появляются уже при развитии осложнений. Кроме того, клинические проявления большинства урогенитальных инфекций неспецифичны. Поэтому, даже при наличии симптомов, не всегда возможно поставить верный диагноз. В этом случае врачу также помогает анализ на урогенитальные инфекции.
Инфекций, передающихся половым путём большое количество, для многих из них половой путь не единственный путь передачи. Некоторые ИППП передаются через кровь, или препараты крови, а также от матери плоду и способны вызывать осложнения беременности и болезни новорожденного.
Инфекции, вызванные безусловно-патогенными микроорганизмами, например, хламидийная, гонококковая, микоплазменная инфекции, требуют обязательного лечения. При несвоевременной диагностике и отсутствии терапии, они способствуют развитию воспалительных заболеваний органов малого таза (ВЗОМТ) у женщин, воспаления яичков и его придатков у мужчин (эпидидимит, орхит). Впоследствии эти осложнения могут стать причиной бесплодия, невынашивания и других осложнений беременности и родов.
Сегодня ИППП занимают ведущее место в структуре инфекционной патологии. Ежедневно более 1 млн. человек заражаются ИППП. По данным Всемирной Организации Здравоохранения распространение урогенитальных инфекций имеет тенденцию к значительному росту.
В числе инфицированных урогенитальными инфекциями может оказаться любой человек, ведущий половую жизнь. И чем чаще происходит смена полового партнера, тем выше риск заражения. При этом всегда надо помнить, что отсутствие неприятных ощущений совсем не означает отсутствие инфекции. Важно периодически проходить лабораторные обследования на урогенитальные инфекции, так как ранний и точный диагноз позволит назначить эффективное лечение и избежать тяжелых осложнений.
Для лабораторной диагностики урогенитальных инфекций используют различные методы и технологии. Основу лабораторной диагностики урогенитальных инфекций составляют методы амплификации нуклеиновых кислот (МАНК), из которых в нашей стране наиболее известным является метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Анализы на инфекции органов репродукции (урогенитальных инфекций) в CMD
В лаборатории Центра молекулярной диагностики (CMD) доступны лабораторные исследования для выявления генетического материала (ДНК) отдельных возбудителей урогенитальных инфекций методом ПЦР. Анализ доступен как в качественном (выявление ДНК возбудителя), так и количественном (определение концентрации ДНК) форматах.
CMD предлагает тест на основе ПЦР в реальном времени в формате «Мультипрайм», позволяющий одновременно выявить четырех наиболее значимых патогенных возбудителей ИППП (гонореи, хламидиоза, трихомониаза и инфекции, вызванной M. genitalium).
Для выявления и определения концентрации условно-патогенных микоплазм и уреаплазм также разработан количественный ПЦР-тест в формате «Мультипрайм».
ПЦР исследования
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой стадии, так и задолго до того, как заболевание может себя проявить.
Это самый современный метод молекулярной биологии.
В настоящее время метод амплификации нуклеиновых кислот (НК) полимеразной цепной реакцией (ПЦР) уже достаточно широко используется в нашем центре как эффективный инструмент лабораторной диагностики.
Лаборатория оснащена необходимым современным оборудованием для ПЦР. В наличии имеется Амплификатор с детекцией в режиме реального времени CFX 96 Touch. Данный прибор относится к новейшей линейке приборов компании BIO-RAD (США) — амплификаторам серии 1000. Он занимает одно из лидирующих мест на рынке ПЦР-диагностики. Позволяет проводить мультиплексный анализ до 5 мишеней (5 инфекций в одной пробирке) в 96 пробах одновременно. Также имеется амплификатор АЛА ¼ производства Латвии. При помощи данного прибора проводится исследование по «конечной точке», т.е. на наличие ДНК/РНК возбудителя (без определения количества). Диагностические наборы реагентов для выявления и количественного определения ДНК/РНК возбудителей урогенитальных инфекций, гепатитов и пневмоний приобретаются в ООО «ИнтерЛабСервис» г. Москва.
Материалом для ПЦР-исследования, в котором можно выявить чужеродную ДНК или РНК бактерии или вируса могут служить различные биологические среды и жидкости человека: моча, плазма крови, мокрота, соскоб эпителиальных клеток, сок простаты, околоплодные воды, плевральная жидкость.
При обследовании на инфекции, передающиеся половым путем (ИППП), у мужчин и женщин с помощью стерильного зонда из половых органов делается соскоб из шейки матки, влагалища или соскоб из уретры (мочеиспускательного канала), моча.
При обследовании на инфекции (герпетические инфекции, ЦМВИ, гепатиты В, С, Д) на ПЦР забирают кровь.
При обследовании на вирусы Эпштейн-Барра, Цитомегаловирус и Герпес 6-го типа в качестве материала забираются кровь из вены, слюна или соскоб из ротовой полости.
Перечень исследований:
1.Определение ДНК вируса гепатита В (HBV) в плазме крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».
2. Количественное определение ДНК вируса гепатита В (HBV) (оценка вирусной нагрузки) в плазме крови методом ПЦР с детекцией в режиме реального времени.
Определяемый фрагмент – специфический участок ДНК вируса гепатита В. Клиническая специфичность теста: 100%. Чувствительность теста составляет 75 МЕ/мл.
Количественная характеристика содержания ДНК гепатита В в клинических образцах важна для оценки эффективности противовирусной терапии.
3. Определение РНК вируса гепатита С (HСV) в плазме крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».
В острую фазу гепатита С РНК вируса выявляют в крови уже через 1-2 недели после инфицирования, т. е. задолго до появления антител к гепатиту С.
4. Количественное определение РНК вируса гепатита С (оценка вирусной нагрузки) в плазме крови методом ПЦР с детекцией в режиме реального времени.
Определяемый фрагмент – специфический участок РНК вируса гепатита С. Клиническая специфичность теста: 100%. Анализируются генотипы 1, 2,3. Чувствительность теста составляет 150 МЕ/мл.
Количественная характеристика содержания РНК гепатита С в клинических образцах важна для оценки эффективности противовирусной терапии и имеет прогностическое значение для определения хронизации этого гепатита. Если концентрация вируса меньше 8х10^5 МЕ/мл, то прогноз курса лечения благоприятный, если выше, то необходимо использовать другие схемы лечения. Вирусная нагрузка ниже 8х10^5 МЕ/мл наряду с определением генотипа вируса является независимым и наиболее информативным параметром прогнозирования эффективности лечения. Снижение концентрации РНК гепатита С к третьему дню от начала терапии на 85% является быстрым и точным параметром для предсказания эффективности терапии, приводящей к раннему вирусологическому ответу.
5. Определение РНК вируса гепатита D (НDV) в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».
Вирус гепатита D передаётся парентеральным путём и обнаруживается только у лиц, инфицированных вирусом гепатита В. Развивающийся в этом случае хронический гепатит, протекает очень тяжело, c массивным поражением печени, часто сопровождается отёками и асцитом.
6. Определение ДНК вируса простого герпеса (HSV) I типа (губного или лабиального) и II типа (генитального) в соскобах эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Вирусы простого герпеса 1-го (ВПГ-1) типа и 2-го (ВПГ-2) типа относят к семейству герпесвирусов (Herpesviridae), общим свойством которых является постоянное персистирование в организме после инфицирования. Попадают в организм через слизистые (обычно «входные ворота» для ВПГ-1 – слизистые ротовой полости и носоглотки, для ВПГ-2 – слизистые половых органов). Клинические проявления герпетической инфекции в любой форме (высыпания на коже и слизистых оболочках, симптомы поражения нервных клеток и др.), как правило, свидетельствуют о снижении иммунитета. Первичная герпетическая инфекция и реактивация инфекции (в гораздо меньшей степени) в период беременности могут вызывать патологию беременности, внутриутробное инфицирование плода или инфицирование ребенка во время родов.
7. Определение ДНК Цитомегаловируса (CMV) в крови и соскобах эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Первичная инфекция или (в меньшей степени) реактивации инфекции в период беременности связаны с риском внутриутробной инфекции, опасной для развития плода. Проявления инфекции зависят от особенностей иммунитета матери, вирулентности и локализации вируса. В целях выявления возможной инфицированности организма цитомегаловирусом, оценки риска возникновения острой инфекции, распознавания первичной инфекции целесообразно выявление вирусной ДНК методом ПЦР.
8. Качественное обнаружение ДНК вируса папилломы человека (HPV) 14 типов высокого онкогенного риска: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 52, 58, 59, 67 в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта.
Вирус папилломы человека (ВПЧ) может быть причиной возникновения рака гениталий у женщин и плоскоклеточного рака у мужчин и женщин. Доказано, что этот вирус является причиной возникновения остроконечных кондилом, кондилом и новообразований шейки матки. Различные виды ВПЧ являются причиной различных поражений. Некоторые из них являются факторами высокого онкогенного риска.
Формат выдачи результата включает суммарный ответ по всем указанным типам ВПЧ-обнаружено/не обнаружено. Результат ОБНАРУЖЕНО следует интерпретировать как наличие в образце специфических участков ДНК одного или нескольких типов ВПЧ без указания конкретного типа (16 тип идентифицируется). Результат НЕ ОБНАРУЖЕНО следует интерпретировать как отсутствие в образце специфических участков ДНК ВПЧ всех указанных типов.
9. Определение ДНК возбудителя гонореи (Neisseria gonorrhoeae) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
У мужчин возбудитель гонореи является причиной уретритов, стриктуры уретры, эпидидимита, простатита, орхита и других заболеваний яичек и его придатков.
У женщин проявляется как уретрит, бартолинит, эндоцервицит, эндометрит, сальпингит и пельвиоперитонит. Симптомы хронической гонореи у женщин могут быть минимальными, заболевание трудно диагностируется.
Новорожденные могут заразиться гонореей при прохождении ребёнка через родовые пути матери (бленнорея новорожденных).
10. Определение ДНК гарднереллы (Gardnerella vaginalis) в соскобах эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Гарднереллёз (бактериальный вагиноз) чаще выявляется у женщин детородного возраста. Заболевание возникает как следствие резкого нарушения баланса микрофлоры влагалища: преобладающие в норме лактобактерии замещаются анаэробными микроорганизмами. Гарднереллёз может являться причиной осложнений беременности: воспалительных заболеваний, маточных кровотечений, послеродового эндометрита, пневмонии у новорождённых.
11. Качественное определение ДНК микоплазмы (Mycoplasma genitalium) в соскобах эпителиальных клеток урогенитального тракта, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Mycoplasma genitalium – микроорганизм, обладающий высокой патогенностью по отношению к клеткам эпителия мочеполовых органов человека, обладает высокой контагиозностью, то есть почти всегда передается половому партнеру. Часто являться причиной негонококкового уретрита и простатита, патологии беременности и плода, бесплодия у женщин и мужчин. Микоплазма гениталиум способна прикрепляться к сперматозоидам и снижать их функциональность (в том числе подвижность), а это может приводить к развитию мужского бесплодия. У женщин этот возбудитель все чаще выявляется при острых эндометритах и аднекситах – воспалениях матки с придатками. Установлено, что Mycoplasma genitalium может вызывать трубное бесплодие у женщин.
12. Определение ДНК Mycoplasma pneumoniae в соскобе эпителиальных клеток из ротоглотки методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
13. Определение ДНК Chlamydia pneumoniae в соскобе эпителиальных клеток из ротоглотки методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Микоплазменная и/или хламидийная пневмония. Атипичные микроорганизмы, вызывающие пневмонию, составляют от 8 до 25% случаев заболевания. В половине случаев ошибочно диагностируются бронхит, трахеит или ОРЗ. Поэтому диагностика микроплазменной и хламидийной пневмоний основывается в первую очередь на выявлении с помощью полимеразно-цепной реакции (ПЦР).
14. Определение ДНК микоплазмы (Mycoplasma hominis) в соскобах эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
В настоящее время микоплазмы принято считать условно-патогенными микробами.
Микоплазмы передаются половым путём, могут являться причиной негонококкового уретрита и простатита, воспалительных заболеваний, патологии беременности и плода, бесплодия у женщин и мужчин. Эти микроорганизмы можно обнаружить, по разным данным, у 15-50% здоровых женщин.
15. Определение ДНК yреаплазмы (Ureaplasma urealyticum/parvum) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Уреаплазмы в настоящее время принято считать условно-патогенными микробами. Уреаплазмы передаются при половых контактах, могут являться причиной негонококкового уретрита и простатита, воспалительных заболеваний, патологии беременности и плода, бесплодия у женщин и мужчин.
16. Определение ДНК хламидии (Chlamydia trachomatis) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Особенности жизненного цикла Chlamydia trachomatis приводят к частому возникновению персистирующей формы инфекции, малочувствительной к терапии. Реактивация инфекции может произойти под действием изменения иммунного или гормонального статуса, травмы, операции, стресса. У Chlamydia trachomatis низкая иммуногенность, вследствие чего у 50% инфицированных людей антитела не обнаруживаются. Поэтому (особенно в сомнительных случаях, при отсутствии антител к хламидии) микроорганизм выявляют только высокочувствительным и специфичным прямым методом – ПЦР.
17. Определение ДНК Кандиды (Candida albicans) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального кожи методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Кандиды выявляются на слизистых оболочках полости рта и желудочно-кишечного тракта у 30-50% здоровых людей и на слизистых оболочках гениталий у 20-30% здоровых женщин. При этом важно различать кандидоз и колонизацию слизистых оболочек и кожи. Микозы обычно развиваются у пациентов с различными нарушениями в системе противоинфекционной защиты (факторами риска).
18. Определение ДНК трихомонады (Trichomonas vaginalis) в соскобах эпителиальных клеток урогенитального тракта, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
19. Определение ДНК вируса Эпштейн-Барра (Epstein-Barr virus) в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».
20. Определение ДНК вируса герпеса 6 типа в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».
Вирус герпеса 6 типа вызывает у детей (в возрасте младше 2,5 лет) внезапную экзантему. В начале высыпания появляются на спине и шее, затем на руках и ногах, на лице сыпь отсутствует. У некоторых заболевших детей лихорадка может приводить к эпилептическим припадкам. Вирус передается оральным и аэрозольным путем. Аналитическая чувствительность тестов для урогенитальных инфекций составляет 1х103 ГЭ/мл.
21. Тест «ФЛОРОЦЕНОЗ».Комплексная оценка условно-патогенной и патогенной (NCMT) микрофлоры
Тест ФЛОРОЦЕНОЗ позволяет комплексно оценить состав биотопа влагалища у женщины репродуктивного возраста и с учетом остроты и риска возникновения осложнений в кратчайшие сроки поможет поставить этиологический диагноз, который позволит назначить эффективную терапию.
В тесте проводится дифференциальная диагностика следующих заболеваний:
Материал для исследования – мазок из влагалища.
Срок исполнения 4 дня.
Исследование проводиться:
Нарушения микрофлоры влагалища широко распространены. К примеру, БВ встречается у 30-40% женщин, ВВК – у 20-45% женщин репродуктивного возраста.
Тест Флороценоз рекомендован при:
