Андрофлор (Исследование микрофлоры урогенитального тракта у мужчин), эякулят в Москве
Исследование микробного состава эякулята с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) для идентификации возбудителей мочеполовых инфекций у мужчин. Данное исследование включает в себя комплексную диагностику острых и хронических заболеваний урогенитального тракта у мужчин.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Андрофлор (Исследование микрофлоры урогенитального тракта у мужчин), эякулят?
Подробное описание исследования
Андрофлор представляет собой комплексное определение состава микробиома урогенитального тракта у мужчин, необходимое для выявления причин заболеваний органов мочеполовой системы.
Бактериальные инфекции урогенитального тракта могут приводить к воспалению уретры, предстательной железы, мочевого пузыря, а также почек. Возбудителей инфекции разделяют на патогенные и условно-патогенные.
Другой группой микроорганизмов, поражающих урогенитальный тракт, являются условно-патогенные бактерии, такие как уреаплазмы, бактероиды и многие другие.
Заселяя урогенитальный тракт в небольшом количестве, указанные микроорганизмы не наносят вреда. При неблагоприятных для организма условиях, таких как снижение иммунитета, тяжелое заболевание, оперативное вмешательство, стресс, отмечается увеличение численности условно-патогенных микроорганизмов в мочеполовой системе наряду со снижением количества представителей нормальной микрофлоры. Подобный дисбаланс способствует воспалению урогенитального тракта.
Симптомы воспаления зависят от того, какой орган поражен. Первично возникают воспалительные явления в уретре, что приводит к развитию уретрита, а также отмечаются жжение и дискомфорт при мочеиспускании, отечность и покраснение головки полового члена, большое количество выделений с неприятным запахом.
Распространение воспалительного процесса на предстательную железу способствует возникновению простатита. Наряду с нарушением мочеиспускания мужчины отмечают боли в области половых органов, иногда в анальной области. Может наблюдаться болезненность при эякуляции и нарушение эрекции.
В ряде случаев заболевания мочеполовой системы у мужчин протекают бессимптомно или с невыраженными проявлениями, что способствует хроническому воспалению и возникновению бесплодия.
Поражение урогенитального тракта бактериями, относящимися к патогенным или условно-патогенным, схоже по клиническим проявлениям. Для выявления возбудителя заболевания часто требуется изучение микробного состава эякулята. Метод полимеразной цепной реакции позволяет надежно идентифицировать обитателей мочеполовой системы и определить наличие бактерий, ответственных за воспаление.
Комплексный анализ Андрофлор в лаборатории «Гемотест» позволяет определить следующие показатели:
Тест показывает присутствие следующих микроорганизмов:
Особенности и преимущества методики
Количественные показатели исследования представляются в геном-эквивалентах (ГЭ).
Относительные показатели представлены в двух вариантах:
Исследование микрофлоры урогенитального тракта мужчин АНДРОФЛОР СКРИН (15 показателей)
Пакет «Андрофлор» — это 24 показателя, необходимых для диагностики состояния урогенитального тракта. Проводится количественное исследование микрофлоры урогенитального тракта у мужчин методом ПЦР в режиме реального времени.
Профили исследований: Андрофлор и Андрофлор Скрин выявляют ДНК безусловно-патогенных (ИППП) и широкий спектр условно-патогенных микроорганизмов с целью диагностики причин воспалительных заболеваний урогенитального тракта мужчин.
Исследование позволяет выявить причину острого и хронического воспалительного процесса, даже в случае отсутствия характерных признаков заболевания и жалоб.
Учёт и интерпретация результатов реакции осуществляется автоматически с помощью программного обеспечения.
При наличии в исследуемом образце ДНК условно-патогенных микроорганизмов, указывается количество микроорганизма.
Показатели, определяемые Набором реагентов для исследования микрофлоры
урогенитального тракта мужчин методом «Андрофлор®»
Показатель
Андрофлор
Андрофлор Скрин
Геномная ДНК человека (ГДЧ)
Общая бактериальная масса (ОБМ)
Megasphaera spp./Veilonella spp./Dialister spp.
Sneathia spp./Leptotrihia spp. /Fusobacterium spp.
Bacteroides spp./Porphyromonas spp./Prevotella spp.
Peptostreptococcus spp./Parvimonas spp.
Pseudomonas aeruginosa/Ralstonia spp./Burkholderia spp.
Болезни мочеполовой системы являются ведущей причиной нарушения репродуктивной функции у мужчин, наиболее частой причиной которых, являются инфекционно-воспалительный процесс, длительность и интенсивность которого определяет степень нарушений репродуктивной функции.
Часто этиологическими факторами развития инфекционно-воспалительного процесса являются облигатные патогенны и вирусы (Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma genitalium, Herpes Simplex Virus типов 1 и 2), однако в последнее годы отмечается существенное увеличение роли условно-патогенных микроорганизмов (Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Haemophilus, Candida и широкий спектр других микроорганизмов).
Микроорганизмы – возбудители заболеваний мочеполовой системы у мужчин (по данным литературы)
Заболевание
Возможные возбудители
Megasphaera, Clostridium BVAB-2, BVAB-3
Материал для исследований
Для исключения искажений результатов определения состава микрофлоры урогенитального тракта мужчин из-за возможного присутствия в урогенитальном тракте транзиторной микрофлоры в течение трех дней перед взятием биоматериала рекомендуется половое воздержание или защищенный половой контакт.
Для диагностики заболеваний нижних отделов урогенитального тракта: уретрита, баланопостита, мониторинга терапии данных заболеваний рекомендованными видами биологического материала являются:
первая порция утренней мочи или первая порция мочи, полученной через 2 и более часов после предшествующего мочеиспускания, используется в исключительных случаях только для идентификации патогенов, без количественной оценки.
Для диагностики заболеваний верхних отделов урогенитального тракта: простатита, мужского бесплодия, мониторинга терапии данных заболеваний рекомендованными видами биологического материала являются:
Андрофлор
Болезни мочеполовой системы являются ведущей причиной нарушения репродуктивной функции у мужчин, что имеет огромное социально-экономическое значение, особенно в современных условиях снижения рождаемости.
Наиболее частой причиной болезней мочеполовой системы у мужчин является инфекционно-воспалительный процесс, длительность и интенсивность которого определяет степень нарушений репродуктивной функции: хроническое воспаление оказывает продолжительное токсическое действие на сперматогенный эпителий, нарушает гематотестикулярный барьер, реологические свойства и химический состав семенной жидкости, а также может приводить к развитию аутоиммунных реакций, например к образованию антиспермальных антител.
В процессе развития воспалительной реакции возрастает количество активированных клеток иммунной системы, что сопровождается повышенным образованием свободных радикалов кислорода и увеличением секреции лимфокинов и монокинов, результатом чего является вторичное воспаление в тканях репродуктивного тракта.
Согласно Международной классификации болезней 10-го пересмотра (МКБ-10), в перечень заболеваний мочеполовой системы у мужчин, причиной которых может быть инфекционно-воспалительный процесс, входят:
Часто этиологическими факторами развития инфекционно-воспалительного процесса являются облигатные патогены и вирусы: Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma genitalium, Herpes Simplex Virus типов 1 и 2, однако в последние годы отмечается существенное увеличение роли условно-патогенных микроорганизмов: Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Haemophilus, Candida и др. (табл. 1).
Таблица 1. Микроорганизмы – возбудители заболеваний мочеполовой системы у мужчин (по данным литературы)
| Заболевание | Возможные возбудители заболевания | Источник информации |
|---|---|---|
| Баланит, баланопостит | Neisseria gonorrhoeae Chlamydia trachomatis Mycoplasma genitalium Trichomonas vaginalis | 8, 17 |
| Bacteroides/Prevotella Аnaerococcus Peptostreptococcus Clostridium | 9,17 | |
| Gardnerella vaginalis | 17 | |
| Candida | 8,17 | |
| Staphylococcus Streptococcus | 30 | |
| Уретрит | Neisseria gonorrhoea | 23 |
| Chlamydia trachomatis | 11 | |
| Mycoplasma genitalium | 11 | |
| Trichomonas vaginalis | 7 | |
| Ureaplasma urealyticum | 14, 34, 44 | |
| Ureaplasma parvum | 7 | |
| Haemophilus | 25 | |
| Candida spp. | 29, 35 | |
| Leptotrichia/Sneathia Megasphaera Clostridium BVAB-2, BVAB-3 | 31 | |
| Staphylococcus Streptococcus | 26 | |
| Corynebacterium | 19 | |
| Простатит | Chlamydia trachomatis | 38, 44 |
| Ureaplasma urealyticum | 38 | |
| Mycoplasma hominis | 38 | |
| E.сoli Enterococcus faecalis | 33, 44 | |
| Pseudomonas aeruginosa | 44 | |
| Bacteroides/Prevotella/Porphyromonas | 5, 10, 40 | |
| Burkholderia pseudomallei | 4, 16 | |
| Staphylococcus Streptococcus | 33 | |
| Corynebacterium | 41 | |
| Орхит, эпидидимит | Neisseria gonorrhoeae | 42 |
| Chlamydia trachomatis | 42, 43 | |
| Enterobacteriaceae | 42, 43 | |
| Pseudomonas aeruginosa | 43 |
Значительную роль в нарушении репродуктивного здоровья мужчин играет воспаление предстательной железы. Простатит – самый частый урологический диагноз у мужчин моложе 50 лет и третий по частоте у мужчин старше 50 лет, при этом приблизительно у 10 % мужчин заболевание диагностируется уже на стадии хронического течения [4, 25, 40].
Острый бактериальный простатит (ОБП) чаще всего является результатом восходящей инфекции мочевого тракта или процедур, затрагивающих мочевой тракт, например уретральной катетеризации или трансректальной биопсии простаты. Бактериальный простатит протекает в острой форме с яркими клиническими проявлениями только в 5 % случаев, что требует обязательной лабораторной диагностики при подозрении на заболевание простаты.
Наиболее часто при ОБП определяются бактерии группы Enterobacteriaceae (87 %), другие грамотрицательные бактерии, такие как Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus и др., встречаются приблизительно в 10 % случаев. В развитии хронической формы заболевания большое значение имеют анаэробные бактерии, в том числе Bacteroides/ Prevotella/ Porphyromonas, ассоциированные с развитием бактериального вагиноза у женщин, а также Burkholderia.
При хроническом течении заболевания более 70 % случаев также имеют инфекционную этиологию, при этом наиболее распространенными микроорганизмами являются: C. trachomatis (>30 %), T. vaginalis (11 %) и U. urealyticum (5 %) [4, 25, 40].
Секреты мужских половых желез (эякулят, секрет простаты, моча после массажа простаты) в случае возникновения простатита часто содержат обильные полимикробные сообщества, включающие как оппортунистические патогены, так и бактерии-комменсалы. Последние играют двойственную роль в мужском урогенитальном тракте, так как при возникновении определенных условий способны вызывать уретриты и простатиты.
Отсутствие патогномоничной симптоматики инфекционно-воспалительных процессов у мужчин, а также преобладание стертого или асимптомного клинического течения обусловливает необходимость введения в практику информативной диагностической технологии, которая позволяет быстро и достоверно выявить фактор воспалительного процесса и выбрать эффективную, этиологически обоснованную лекарственную терапию.
В настоящее время перечень лабораторных исследований, рекомендованный стандартами оказания медицинской помощи при заболеваниях мочеполовой системы у мужчин, включает бактериологический и микробиологический методы (табл. 2).
Таблица 2. Виды лабораторных исследований для диагностики заболеваний мочеполовой системы у мужчин, рекомендованные в стандартах медицинской помощи
На данный момент культуральный и микроскопический методы рассматриваются в международной и российской лабораторной практике как имеющие ряд существенных ограничений, которые затрудняют получение объективного результата обследования.
Метод микроскопии – самый быстрый и дешевый, его использование связано с минимальными требованиями к организации лаборатории. Однако использование микроскопии для диагностики инфекционных заболеваний сопряжено:
Так, при диагностике трихомониаза микроскопический метод имеет самую низкую чувствительность: в среднем 30 % (для женщин – 50–60 %, для мужчин – 10–12 %), тогда как метод ПЦР достоверно определяет возбудителя в 90–96 % случаев (Sexually Transmitted Diseases Treatment Guidelines, CDC, 2010).
Национальный центр по предупреждению заболеваний (CDC, USA) с 2006 г. для диагностики трихомониаза у мужчин не рекомендует применение микроскопиии, указывает на информативность культурального исследования выделений, мочи и спермы.
Особенно затруднительна диагностика в случае низкокопийных препаратов или биоматериала, содержащего значительное количество клеток эпителия и лейкоцитов. При сравнении чувствительности микроскопических методов исследования и ПЦР показано, что частота выявляемости N. gonorrhoeae при микроскопии у мужчин – 80–95 %, у женщин – 30–50 %, C. trachomatis – 10–12 %; использование метода ПЦР дает возможность определять указанные микроорганизмы с чувствительностью более 95 % [6, 28, 36, 39, 46].
Кроме того, при микроскопии мазков можно идентифицировать микроорганизмы, присутствующие в биоматериале в количестве выше 105 КОЕ/мл, тогда как многие факультативно-анаэробные и аэробные бактерии могут проявлять патогенный эффект при сравнительно небольшом количестве (до 104 КОЕ/мл), которое не выявляется при микроскопии. Данные обстоятельства существенно снижают диагностическую ценность микроскопического исследования.
Метод ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени (ПЦР-РВ) позволяет выявлять ДНК/РНК микроорганизмов вне зависимости от их культуральных и морфологических особенностей, в том числе микроорганизмов, не поддающихся культивированию; охарактеризовать структуру микробиоты соответствующего биотопа для оценки патогенетической роли каждой группы микроорганизмов у данного пациента.
Комбинация высокой чувствительности и специфичности, скорость (1-1,5 часа) получения результата, возможность количественного анализа и диагностики некультивируемых микроорганизмов делают технологию ПЦР-РВ максимально удобной и клинически значимой в исследовании инфекционных заболеваний.
Количественный анализ микроорганизмов с помощью ПЦР-РВ в настоящее время используется для изучения нормальной, патогенной и условно-патогенной микрофлоры в разных биотопах человека: периодонте [20], респираторном тракте [47], образцах из желудочно-кишечного тракта [18] и вагинального микробиома у женщин [27].
Подобный подход использован в Наборе реагентов для исследования биоценоза урогенитального тракта у женщин методом ПЦР в режиме реального времени «Фемофлор®». Исследования «Фемофлор®» защищены патентом (No 2008 105 063 от 13.02.2008 «Способ диагностики дисбаланса микробиоты различных биотопов человека и степени его выраженности»), разрешены к применению на территории РФ (регистрационное удостоверение No ФСР 2009/04663 от 01.04.2009), ежегодно с 2011 года вводятся в Перечень видов высокотехнологичной медицинской помощи по профилю «Акушерство и гинекология». Получено РАЗРЕШЕНИЕ ФС No2011/375 от 22 ноября 2011 г. на применение новой медицинской технологии «Применение метода полимеразной цепной реакции в реальном времени для оценки микробиоценоза урогенитального тракта у женщин (тест «Фемофлор®»)».
В 2014 г. авторский коллектив врачей и ученых под руководством генерального директора группы компаний «ДНК-Технология» д.б.н. Д. Ю. Трофимова был признан победителем Национальной медицинской премии лучшим врачам России «Призвание» в номинации «За создание нового метода диагностики» – технологии «Фемофлор®».
В настоящее время актуальным направлением в исследовании биоценозов является сравнение микробного состава УГТ половых партнеров с целью разработки эффективного алгоритма лабораторного обследования пар и подбора терапии в случае выявления у одного/обоих партнеров заболеваний репродуктивной системы инфекционной этиологии либо нарушений репродуктивной функции.
Например, при обследовании половых партнеров пациенток с бактериальным вагинозом морфотипы ассоциированных с бактериальным вагинозом микроорганизмов выявлялись у 25 % мужчин, при этом клинические проявления (баланопостит) наблюдались у 3 % пациентов. Кроме того, условно-патогенные микроорганизмы – потенциальные возбудители воспалительных заболеваний УГТ могут попадать в уретру при анальных и орогенитальных контактах, что создает опасность заражения обоих половых партнеров.
Принимая во внимание клиническую и социальную значимость заболеваний мочеполовой системы у мужчин, часто стертого или асимптомного течения, а также важность равноценного обследования обоих половых партнеров при нарушениях репродуктивной функции и наличии заболеваний урогенитального тракта, компания «ДНК-Технология» разработала и внедрила уникальную технологию «Андрофлор®», которая позволяет осуществлять диагностику инфекционно-воспалительных заболевания мочеполовой системы у мужчин (табл. 3).
Таблица 3. Наборы реагентов для исследования микрофлоры урогенитального тракта мужчин методом ПЦР в режиме реального времени «Андрофлор®», «Андрофлор® Скрин»
| Наименование набора | Формат детекции | РУ | Назначение* | |||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Форез | Flash | Rt | qPCR | |||
| Набор реагентов для исследования микрофлоры урогенитального тракта мужчин методом ПЦР в режиме реального времени «Андрофлор®» | — | — | — | — | — | RUO |
| Набор реагентов для исследования микрофлоры урогенитального тракта мужчин методом ПЦР в режиме реального времени «Андрофлор® Скрин» | — | — | — | — | — | RUO |
* Примечания: RUO – наборы реагентов не имеют регистрационного удостоверения, облагаются НДС 18 %
Одно исследование микрофлоры урогенитального тракта мужчин методом ПЦР в режиме реального времени «Андрофлор®» позволяет полностью заменить комплекс методов ПЦР-РВ, предлагаемых в стандартах медицинской помощи, которые утверждены Минздравом России в 2012 г., а также расширить его за счет дополнительной диагностики облигатных анаэробов.
Варианты комплектации набора «Андрофлор®» зависят от количества выявляемых микроорганизмов (табл. 4).
Таблица 4. Показатели, определяемые Набором реагентов для исследования микрофлоры урогенитального тракта мужчин методом ПЦР в режиме реального времени «Андрофлор®»
| Показатель | Андрофлор® | Андрофлор® Скрин |
|---|---|---|
| Геномная ДНК человека (ГДЧ) | + | + |
| Общая бактериальная масса (ОБМ) | + | + |
| Lactobacillus spp. | + | + |
| Staphylococcus spp. | + | + |
| Streptococcus spp. | + | + |
| Corynebacterium spp. | + | + |
| Gardnerella vaginalis | + | + |
| Atopobium cluster | + | — |
| Megasphaera spp./Veilonella spp./Dialister spp. | + | — |
| Sneathia spp./Leptotrihia spp. /Fusobacterium spp. | + | — |
| Ureaplasma urealyticum | + | + |
| Ureaplasma parvum | + | + |
| Mycoplasma hominis | + | + |
| Bacteroides spp./Porphyromonas spp./Prevotella spp. | + | — |
| Anaerococcus spp. | + | — |
| Peptostreptococcus spp./Parvimonas spp./Eubacterium spp. | + | — |
| Pseudomonas aeruginosa/Ralstonia spp./Burkholderia spp. | + | — |
| Heamophilus spp. | + | — |
| Enterobacteriaceae/Enterococcus spp. | + | + |
| Candida spp. | + | + |
| Mycoplasma genitalium | + | + |
| Trichomonas vaginalis | + | + |
| Neisseria gonorrhoeae | + | + |
| Chlamydia trachomatis | + | + |
Назначение технологии «Андрофлор®»:
Материал для исследования
ВНИМАНИЕ! Для исключения искажений результатов определения состава микрофлоры урогенитального тракта мужчин из-за присутствия в урогенитальном тракте транзиторной микрофлоры в течение трех дней перед взятием биоматериала рекомендуется половое воздержание или защищенный половой контакт.
*При подозрении на острый простатит выполнять массаж простаты категорически запрещено!
Интерпретация результатов исследования формируется согласно алгоритму (рис. 1).
Рис. 1. Принципиальная схема алгоритма автоматической трактовки результатов
Формат наборов: наборы раскапаны в стрипованные пробирки (8 шт. по 0,2 мл).
Температура хранения: компоненты набора следует хранить при температуре от 2 °С до 8 °С в течение всего срока годности.
Срок годности:12 месяцев.
Наборы реагентов для выделения ДНК: ПРОБА-НК-ПЛЮС; ПРОБА-ГС-ПЛЮС.
Оборудование, необходимое для проведения анализа: приборы серии ДТ производства ООО «НПО ДНК-Технология» (ДТлайт, ДТпрайм, ДТ-96).
Для проведения анализа с использованием стрипованных пробирок необходимо дополнительное оборудование: штатив и насадка на микроцентрифугу (вортекс) для стрипованного пластика.
Приборы серии ДТ производства компании «ДНК-Технология» оснащены специально разра- ботанным русскоязычным программным обеспечением (ПО), поддерживающим автоматическую обработку данных и выдачу результатов исследования в удобной для интерпретации форме (рис. 2).
Рис. 2. Приборы серии ДТ: А. Амплификатор детектирующий ДТпрайм Б. Амплификатор детектирующий ДТлайт
Уникальные технические характеристики приборов позволяют существенно сократить общее время проведения анализа. Это значительно экономит время исследования и обеспечивает высокую пропускную способность лаборатории.
Существенным преимуществом ПО является возможность одновременной реализации качественного и количественного мультиплексного анализа.
Кроме того, программа позволяет выдавать результаты в удобной и наглядной форме для анализа полученных данных врачами-клиницистами (рис. 3).
Исследование микрофлоры урогенитального тракта мужчин АНДРОФЛОР (24 показателя)
Пакет «Андрофлор» — это 24 показателя, необходимых для диагностики состояния урогенитального тракта. Проводится количественное исследование микрофлоры урогенитального тракта у мужчин методом ПЦР в режиме реального времени.
Профили исследований: Андрофлор и Андрофлор Скрин выявляют ДНК безусловно-патогенных (ИППП) и широкий спектр условно-патогенных микроорганизмов с целью диагностики причин воспалительных заболеваний урогенитального тракта мужчин.
Исследование позволяет выявить причину острого и хронического воспалительного процесса, даже в случае отсутствия характерных признаков заболевания и жалоб.
Учёт и интерпретация результатов реакции осуществляется автоматически с помощью программного обеспечения.
При наличии в исследуемом образце ДНК условно-патогенных микроорганизмов, указывается количество микроорганизма.
Пакет «Андрофлор» включает в себя:
1. Геномная ДНК человека (ГДЧ)
2. Общая бактериальная масса (ОБМ)
3. Lactobacillus spp.
4. Staphylococcus spp.
5. Streptococcus spp.
6. Corinebacterium spp.
7. Gardnerella vaginalis
8. Megasphera spp. +Veillonella spp. + Dialister spp.
9. Sneathia spp.+Leptotrichia spp. + Fusobacterium spp
10. Ureaplasma urealyticum
11. Ureaplasma parvum
12. Mycoplasma hominis
13. Atopobium claster
14. Bacteroides spp. / Porphyromonas spp. / Prevotella spp
15. Anaerococcus spp.
16. Peptostreptococcus spp. / Parvimonas spp.
17. Eubacterium spp.
18. Haemophilus spp.
19. Pseudomonas aeruginosa /Ralstonia spp. / Burkholderia spp.
20. Enterobacteriaceae spp. / Enterococcus spp.
21. Candida spp.
22. Mycoplasma genitalium
23. Trichomonas vaginalis
24. Neisseria gonorrhoeae
25. Chlamydia trachomatis
Болезни мочеполовой системы являются ведущей причиной нарушения репродуктивной функции у мужчин, наиболее частой причиной которых, являются инфекционно-воспалительный процесс, длительность и интенсивность которого определяет степень нарушений репродуктивной функции.
Часто этиологическими факторами развития инфекционно-воспалительного процесса являются облигатные патогенны и вирусы (Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma genitalium, Herpes Simplex Virus типов 1 и 2), однако в последнее годы отмечается существенное увеличение роли условно-патогенных микроорганизмов (Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Haemophilus, Candida и широкий спектр других микроорганизмов).
Микроорганизмы – возбудители заболеваний мочеполовой системы у мужчин (по данным литературы)
