Иммунный статус. Общая информация
Иммунный статус (ИС) – совокупность количественных и функциональных показателей, отражающих состояние иммунной системы человека в данный момент времени. Это понятие введено для объективной оценки состояния иммунной системы человека. Изучение показателей иммунитета при иммунных нарушениях должно включать исследования количества и функциональной активности основных компонентов иммунной системы. Все нарушения функции иммунной системы классифицируют, исходя из проявлений различных заболеваний. Выделяют первичные и вторичные иммунодефициты, аутоиммунные, аллергические и лимфопролиферативные заболевания.
Для оценки функционирования всех компонентов иммунной системы, Т и В системы иммунитета, фагоцитарной и системы комплемента, должны быть включены количественные и функциональные методы. Для оценки гуморального звена иммунитета выполняют следующие исследования: определение продукции иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови; определение относительного и абсолютного содержания В-лимфоцитов и их субпопуляций, компонентов комплемента и циркулирующих иммунных комплексов, функциональные тесты (реакция бласттрансформации с митогенами), определение специфических антител, кожные пробы.
Для оценки Т-клеточного звена проводят исследования с определением относительного и абсолютного количества Т-лимфоцитов и их субпопуляций (Т-хелперов, ЦТЛ), натуральных киллеров, их активационных маркеров, функциональные тесты (реакция бласт-трансформации с митогенами), определение продукции цитокинов.
Состояния фагоцитарной системы оценивают по многим тестам: адгезивная способность нейтрофилов по прилипанию к волокнам нейлона; миграция, хемотаксис в реакции торможения миграции нейтрофилов; метаболическая активность и образование активных форм кислорода по восстановлению нитросинего тетразолия; фагоцитарная активность нейтрофилов в тестах спонтанного и стимулированного микробными полисахаридами фагоцитоза; иммунофенотипирование нейтрофилов.
Ранее эти методы были разделены на тесты 1-го и 2-го уровня. Тесты 1-го уровня являются ориентировочными и направлены на выявление грубых дефектов в иммунной системе. Тесты 2-го уровня направлены на идентификацию конкретной “поломки” в иммунной системе.
Тесты 1-го уровня
С помощью минимального набора тестов можно диагностировать первичные иммунодефициты: хроническую грануломатозную болезнь, Х-сцепленную агамма-глобулинемию, гипер–IgM–синдром, селективный дефицит IgA, синдром Вискотта-Олдрича, тяжелый комбинированный иммунодефицит.
Тесты 2-го уровня
Набор полученных показателей при иммунологическом обследовании называется иммунограммой.
Следует особо подчеркнуть, что полноценный анализ иммунограммы возможен только в комплексе с клиническим состоянием и анамнезом пациента. Отсутствие характерных сдвигов в иммунограмме при выраженных клинических симптомах следует считать атипичной реакцией иммунной системы, что является отягощающим признаком заболевания. Полученные данные пациента сравниваются со средними значениями для данного аналита, полученными в регионе проживания пациента. Среднестатистические показатели различаются в зависимости от региона и подчиняются климатогеографическим условиям, экологической обстановке, условиям жизни. Необходимо также учитывать возраст пациента и циркадные ритмы.
Исследование показателей ИС имеет большое значение для диагностики и дифференциальной диагностики, особенно при первичных иммунодефицитах и лимфопролиферативных заболеваниях, для оценки тяжести, активности, длительности течения и прогноза различный заболеваний, оценки эффективности проводимого лечения.
НСТ-тест
Описание
Приём биоматериала: вс, пн, вт, ср.
НСТ-тест характеризует бактерицидную активность фагоцитов, т.е. способность уничтожать микробные клетки.
Одна из функций гранулоцитов — это фагоцитарная активность. Снижение фагоцитарной активности может быть результатом как недостаточности опсонизирующих факторов сыворотки, так и дефектов самих клеток. (нарушения двигательной и метаболической активности врождённого или приобретённого характера).
Тест с нитросиним тетразолием используется для выявления так называемых активированных гранулоцитов и моноцитов. В основе активации фагоцитов лежит резкое усиление окислительных реакций. К числу индикаторов этого явления относятся НСТ-тест. Поглощенные из раствора НСТ, под влиянием окислительных процессов в клетке, превращаются в нерастворимый формазан. Последний определяется в клетке в виде темно-синих гранул.
Спонтанный и индуцированный НСТ-тест
Различают спонтанный и стимулированный НСТ-тест. Результаты спонтанного теста указывают на количество активированных клеток по крови больного, например под влиянием инфекции. Результаты стимулированного теста дают представление о способности исследуемых нейтрофилов к активации in vitro. Этот тест следует проводить при сниженном числе спонтанных НСТ-положительных клеток у больного, чтобы выявить наличие или отсутствие окислительного метаболизма.
Накануне проведения исследования необходимо исключить эмоциональные и физические нагрузки, спортивные тренировки, курение.
Спонтанный тест с НСТ
Весь контент iLive проверяется медицинскими экспертами, чтобы обеспечить максимально возможную точность и соответствие фактам.
У нас есть строгие правила по выбору источников информации и мы ссылаемся только на авторитетные сайты, академические исследовательские институты и, по возможности, доказанные медицинские исследования. Обратите внимание, что цифры в скобках ([1], [2] и т. д.) являются интерактивными ссылками на такие исследования.
Если вы считаете, что какой-либо из наших материалов является неточным, устаревшим или иным образом сомнительным, выберите его и нажмите Ctrl + Enter.
Спонтанный тест с НСТ (нитросиний тетразолий) позволяет оценить состояние кислородзависимого механизма бактерицидности фагоцитов (гранулоцитов) крови in vitro.
В норме у взрослых количество НСТ-положительных нейтрофилов составляет до 10%.
Он характеризует состояние и степень активации внутриклеточной НАДФ-Н-оксидазной антибактериальной системы. Принцип метода основан на восстановлении поглощённого фагоцитом растворимого красителя НСТ в нерастворимый диформазан под влиянием супероксиданиона (предназначен для внутриклеточного уничтожения инфекционного агента после его поглощения), образующегося в НАДФ-Н-оксидазной реакции. Показатели НСТ-теста повышаются в начальный период острых бактериальных инфекций, тогда как при подостром и хроническом течении инфекционного процесса они снижаются. Санация организма от возбудителя сопровождается нормализацией показателя. Резкое снижение свидетельствует о декомпенсации противо-инфекционной защиты и считается прогностически неблагоприятным признаком.
Тест с НСТ играет важную роль в диагностике хронических гранулематозных заболеваний, которые характеризуются наличием дефектов в НАДФ-Н-оксидазном комплексе. Для пациентов с хроническими гранулематозными заболеваниями характерно наличие рецидивирующих инфекций (пневмония, лимфаденит, абсцессы лёгких, печени, кожи), вызываемых Staphylococcus aureus, Klebsiella spp., Candida albicans, Salmonella spp., Escherichia coli, Aspergillus spp., Pseudomonas cepacia, Mycobacterium spp. и Pneumocystis carinii.
Нейтрофилы у пациентов с хроническими гранулематозными заболеваниями имеют нормальную фагоцитарную функцию, но вследствие дефекта в НАДФ-Н-оксидазном комплексе не способны уничтожать микроорганизмы. Наследственные дефекты НАДФ-Н-оксидазного комплекса в большинстве случаев сцеплены с хромосомой X, реже аутосомно-рецессивные.
Снижение спонтанного теста с НСТ характерно для хронизации воспалительного процесса, врождённых дефектов фагоцитарной системы, вторичных и первичных иммунодефицитов, ВИЧ-инфекции, злокачественных новообразований, тяжёлых ожогов, травм, стрессов, недостаточности питания, лечения цитостатиками и иммунодепрессантами, воздействия ионизирующего излучения.
Повышение спонтанного теста с НСТ отмечают при антигенном раздражении вследствие бактериального воспаления (продромальный период, период острого проявления инфекции при нормальной активности фагоцитоза), хроническом гранулематозе, лейкоцитозе, усилении антителозависимой цитотоксичности фагоцитов, аутоаллергических заболеваниях, аллергии.
[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8]
Влияние аутологичной крови в состоянии гипоосмоса на иммунную систему организма
Биологические науки № 3, 1987
ВЛИЯНИЕ АУТОЛОГИЧНОИ КРОВИ В СОСТОЯНИИ ГИПООСМОСА НА ИММУННУЮ СИСТЕМУ ОРГАНИЗМА
Р. Н. Ходанова, Л. С. Сеславина, Н. Н. Голубева, В. В. Мальцева, В. А. Зуява, О. Н. Кутькова
Проведен анализ иммунного статуса у больных нейродермитом в от вет на лечение аутологичнои кровью. Установлено, что достигаемый терапевтический эффект коррелирует с рядом иммунологических показателей; повышается содержание лизоцима в сыворотке крови и в слюне, увеличи вается метаболическая активность нейтрофилов, несколько возрастает количество Т-лимфоцитов, восстанавливается баланс субпопуляций Т-лим фоцитов.
The analysis of the ummune status of patients under neurodermite after autologic blood treatment has been performed. It has been found that posi tive therapeutic effect correlates with a number of immunologic parameters: the lysozyme content raises, the metabolic activity of neutrophilic cells increases, a number of T-lymphocytes grows to a certain degree, the balance of T-lymphocyte subpopulation normalizes.
Иммунная система играет важную роль в обеспечении гомеостаза организма. Достижения иммунологии последних лет в исследовании эндогенных биологически активных веществ, интерлейкинов и лимфоки нов, вновь возродили интерес к действию на организм аутологичнои крови и ее компонентов. Существенно, что в ряде случаев дополнительная обработка крови обеспечивает усиление вызываемого ею иммунокорре гирующего эффекта. Так, Е. Г. Кирдей и соавторы [2] показали, что разрушение эритроцитов и гранулоцитов способствует формированию клеточного иммунного ответа, усиливая реакцию гиперчувствительности замедленного типа и цитотоксическую активность лимфоцитов. При использовании цельной крови стимулирующий эффект достигается пред варительным нагреванием ее до 38—40 °С [8]. Выраженное терапевти ческое действие коррелирует с изменением иммунологических характе ристик при ультрафиолетовом облучении собственной крови [4, 6]. Авторы предполагают, что для стимуляции иммунного ответа могут иметь значение структурно-функциональные перестройки поверхности иммунокомпетентных клеток, приводящие к обнажению рецепторов. Нельзя, видимо, также умалять роль клеточных компонентов и веществ, образующихся в результате модификации мембраны клетки и обога щающих жидкую фракцию крови. Необходимость изучения этих явлений и механизмов очевидна.
Биологические науки № 3, 1987
Мы исследовали кинетику некоторых иммунологических показате лей у пациентов, страдающих нейродермитом, в ответ на лечение их аутологичной кровью по методу Р. Н. Ходановой [7], которое предусматривает внутрикожные инъекции аутокрови, находящейся в состоянии гипоосмоса. Полученные данные описаны в настоящей статье.
Были обследованы 26 человек до лечения, в процессе лечения (14-дневный курс) и спустя 1,5—2 месяца после проведенной терапии. Результаты обработаны статисти чески.
Для оценки иммунного статуса больных проводили количественный учет Т- и В-лимфоцитов (Е-РОК и ЕАС-РОК соответственно), а также теофиллинустойчивой (ТФУ) и теофиллинчувствительной (ТФЧ) субпопуляций Т-клеток [12]. Энергетиче ское состояние лимфоцитов оценивали цитохимическим методом Р. Н. Нарциссова [5], определяя активность митохондриальных дегидрогеназ с сукцинатом и «-глицерофос фатом в качестве субстратов. Секреторную функцию иммунной системы определяли по содержанию в сыворотке крови иммуноглобулинов А, М, G. Кроме того, исследо вали фагоцитарную активность нейтрофилов (ФАН) по отношению к убитому стафи лококку и активность окислительно-восстановительных ферментов в этих клетках в тестах с нитросиним тетразолием (НСТ) [3, 10, 11]. Под влиянием дегидрогеназной системы нейтрофила бесцветный НСТ восстанавливается в темно-фиолетовые гранулы формазана. Сравнительное изучение этой реакции в интактных клетках (спонтанный НСТ-тест) и предварительно стимулированных пирогеналом (активированный НСТ- тест) позволяет судить о потенциальных ресурсах системы фагоцитоза. В сыворотке и слюне определяли содержание лизоцима, активность которого имеет значение в им мунологической реактивности организма [1, 9].
В результате исследования иммунологического статуса у больных нейродермитом, прошедших курс лечения описанным методом, получе ны следующие данные (табл.). Средние величины содержания Т- и В-лимфоцитов в крови перед началом лечения в основном укладывались в норму (58±2 и 10±1 % соответственно), но имели большой диапазон колебаний внутри группы (от 40 до 78 % для Т-лимфоцитов и от 4 до 24 % Для В-лимфоцитов). В то же время количественный анализ субпо пуляций Т-лимфоцитов выявил выраженную разницу между здоровыми и больными людьми: у больных содержание ТФУ-клеток было досто верно более высоким. Около 70 % больных до лечения имели индекс
Динамика показателей состояния иммунитета у больных нейродермитом в процессе лечения по сравнению с нормой
В процессе лечения
Через 2 месяца после лечения
Число лейкоцитов, тыс. кл/мм 3
Концентрация лизоцима, г/л в сыворотке крови в слюне
Биологические науки № 3, 1987 23
ТФУ/ТФЧ выше 4 (в норме он равен 2), в отдельных случаях индекс ТФУ/ТФЧ составлял 7, 19 и даже 30.
При исследовании митохондриальных дегидрогеназ установлено, что у 60 % больных до лечения уровень активности сукцинатдегидроге- назы (СДГ) и а-глицерофосфатдегидрогеназы (а-ГФДГ) отвечал нор мальным показателям, а соотношение активностей этих ферментов соот ветствовало норме у 40 % больных.
Примененное терапевтическое воздействие уже на 1—7-е сутки вы зывало значительное снижение суммарной активности а-ГФДГ в лимфоцитах, что влекло за собой дисбаланс соотношения активностей изученных ферментов. В этот период нормальные показатели а-ГФДГ и физио логический баланс ферментов не были выявлены ни у одного больного. Отметим, что в эти же сроки среди лимфоцитов появилась большая по пуляция клеток, не активных в отношении а-ГФДГ (т. е. с крайне низ ким количеством гранул формазана), число которых к 10—14-м суткам по сравнению с нормой возросло с 9 до 25%. Спустя 1,5—2 месяца после проведенного курса лечения количественные характеристики изу ченных ферментов приближались к нормальным.
Из представленных данных следует, что примененное лечение оказывает значительное и быстрое влияние на обменные процессы в лим фоцитах. Аутологичная кровь в состоянии гипоосмоса, по-видимому, воздействует не только на активность ферментов. Принимая во внима ние распределение популяции лимфоцитов по уровню а-ГФДГ в началь ные сроки лечения (имеется в виду появление большого количества «не активных» клеток), можно полагать, что она стимулирует выброс в кро вяное русло клеток с иной метаболической характеристикой.
Об уровне секреторной функции иммунокомпетентных клеток суди ли по концентрации в сыворотке больных иммуноглобулинов А, М, G. До начала лечения этот показатель находился в пределах нормы, одна ко у большинства пациентов (77, 77 и 74 % для иммуноглобулинов А, М и G соответственно) располагался в интервале между средней вели чиной нормы и нижней ее границей. Проведенное лечение выраженного изменения этого иммунологического показателя не вызвало. Выявлена лишь некоторая тенденция к уменьшению концентрации иммуноглобу линов: возросло число больных с заметно заниженными и уменьши лось— с повышенными значениями; колебания уровня от средней величины до нижней ее границы стали составлять 100, 100 и 85 % для имму ноглобулинов А, М и G соответственно. Однако достоверными эти изме нения оказались только для иммуноглобулина А.
В ходе исследования получены также данные, характеризующие ре акцию неспецифического иммунитета организма. Оказалось, что число
24 Биологические науки № 3, 1987
фагоцитирующих нейтррфилов не отражает существа перестроек, про исходящих в организме под действием лечения (процентное количество этих клеток у больных соответствовало таковому у здоровых и в про цессе лечения не менялось). В то же время наглядными были тесты,, характеризующие метаболическую активность нейтрофилов, поскольку они указывали на нормализацию функционального состояния клеток. Так, несмотря на то что спонтанный НСТ-тест постоянно выявляет у больных нейродермитом повышенное «напряжение» клетки (26±5 при норме 12±2), возрастание разницы между спонтанным и активирован ным тестами НСТ (10±2 и 19±3) говорит от увеличении потенциальных возможностей микробоцидной системы нейтрофилов. Убедительным от ражением положительных изменений в функции нейтрофилов и моноцитов в ответ на проведенное лечение служат также данные об изменениях содержания лизоцима в сыворотке и особенно в слюне.
Описанные результаты свидетельствуют о чрезвычайно быстрой реакции иммунной системы организма на примененное воздействие ауто логичной кровью. Особенно наглядны в этом отношении цитохимические исследования, которые выявили быструю перестройку метаболизма лим фоцитов и нейтрофилов, а также данные о динамике субпопуляций Т-лимфоцитов. Достигаемый терапевтический эффект коррелировал с рядом иммунологических показателей, отражающих благоприятное действие примененного метода лечения нейродермита: повышалась концентрация лизоцима, увеличивалась активность нейтрофилов в сравни тельном НСТ-тесте, несколько возрастало количество Т-лимфоцитов,. восстанавливался баланс субпопуляций Т-лимфоцитов. Вместе с тем у всех больных на протяжении первой недели лечения были отмечены и не имеющие пока убедительного объяснения парадоксальные изменения,, которые заключаются в появлении большого числа «неактивных» по а-ГФДГ Лимфоцитов и резком возрастании численности ТФУ-лимфоци-тов, что приводило к еще более выраженному дисбалансу субпопуляций. Известно, что теофиллин оказывает на мембраны Т-лимфоцитов двоякое действие — на части зрелых клеток он маскирует рецепторы к эритроци там барана, а на незрелых Т-лимфоцитах он может вызывать их экс прессию. Это позволяет предполагать гетерогенность ТФУ-субпопуляции в случае резкого возрастания ее числа в первые дни лечения больных. Есть основание считать, что дополнительной к исходной популяции ТФУ-клеток на 4—8-е сутки лечения могут быть мигрирующие в кровя ное русло незрелые лимфоциты, относящиеся, по-видимому, к субпопуляции предшественников Т-клеток. Выяснение путей индукции этих кле ток, их дифференцировки и осуществления эффекторного действия — один из существенных моментов в изучении механизмов терапевтиче ского действия примененного метода лечения.
Таким образом, при обследовании больных нейродермитом, ле ченных по методу Р. Н. Ходановой аутологичной кровью в условиях гипоосмоса, обнаружена быстрая и глубокая реакция различных звень ев иммунной системы организма. Как показал анализ, выявленные ре акции имеют иммунокоррегирующую направленность.
1. Бухарин О. В., Васильев Н. В. Лизоцим и его роль в биологии и меди
цине. Томск, 1974.
2. Кирдей Е. Г., Нечаева В. И, и др. Влияние разрушенных эритроцитов и
гранулоцитов на формирование клеточного иммунного ответа. — Иммунология,
1985, № з, с. 76—78.
3. Климов В. В., К-ошовкина Т. В. Тест восстановления нитросинего тетра-
золия, стимулированного пирогеналом. — Лабораторное дело, 1982, № 10, с. 624—
626.
4. К р ы л е н к о в В. А., Кукуй Л. М. и др. Облученная ультрафиолетовым све
том кровь: фотохимия, иммунологическое действие. — Докл. АН СССР, 1983 V
т. 270, № 1, с. 242—246. ‘
Биологические науки № 3, 1987 25
5. Н а р ц и с с о в Р. Н. Применение н-нитротетразоляя фиолетового для количест венной цитохимии дегидрогеназ лимфоцитов человека. — Арх. патологии, 1969, № 5, с. 85—88.
«6. П о т а ш о в Л. В., Ч е м и н а в а Р. В. Ультрафиолетовое облучение собственной крови. — Вестн. хирургии, 1982, № 6, с. 130—134.
7. X о д а н о в а Р. Н. Способ лечения аллергических заболеваний. Авт. свидетель
ство СССР № 741877. — Бюл. изобрет., 1980, № 23.
8. Ш ахтм ейстер И. Я., Зудин Б. И. и др. Способ повышения иммунологиче
ской реактивности организма (его варианты). Авт. свидетельство СССР
№ 923550′. — Бюл. изобрет., 1982, № 16,
9. Barling P. M. et al. The isolation and characterization of lysozyme from human
fortal membranes comparison with the enzyme from other sources. — Сотр. Bioc-
hem. a. Physiol., 1985, B. 81. № 2, p. 509—511.
10. Lace J. K. et al. An appraisal of the nitroblue tetrazolium reduction test. — Amer.
Journ. Med., 1975, v. 58, p. 685—696.
11. Park В. Н. The use and limitations of the nitroblue tetrazolium test as a diagnos
tic acid. — Journ. Pediatr., 1971, v. 78, p. 376—378.
12. Shore A., et. al. Induction and separation of antigendependent T-helper and T-sup-
ressor cells in men. — Nature (London), 1978, v. 274, p. 586—587.
Рекомендована Институтом иммунологии Министерства здравоохранения СССР. Поступила 19 ноября 1986 г.
Заполните все обязательные поля, пожалуйста
Нст тест что это такое
АНМО «Ставропольский краевой клинический консультативно-диагностический центр»:
355017, г. Ставрополь, ул. Ленина 304
(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)
(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)
Обособленное подразделение «Диагностический центр на Западном обходе»:
355029 г. Ставрополь, ул. Западный обход, 64
(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)
Клиника семейного врача:
355017 г. Ставрополь, пр. К. Маркса, 110 (за ЦУМом)
(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)
(8652) 31-50-60 (регистратура)
357107, г. Невинномысск, ул. Низяева 1
(86554) 95-777, 8-962-400-57-10 (регистратура)
Обособленное структурное подразделение в г. Черкесске :
369000, г. Черкесск, ул. Умара Алиева 31
8(8782) 26-48-02, +7-988-700-81-06 (контактные телефоны)
Обособленное структурное подразделение в г. Элисте :
358000, г. Элиста, ул. Республиканская, 47
8(989) 735-42-07 (контактные телефоны)
ЗАО «Краевой клинический диагностический центр»:
355017 г. Ставрополь, ул. Ленина 304
(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)
(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)
Обособленное структурное подразделение на ул. Савченко, 38 корп. 9:
355021, г. Ставрополь, ул. Савченко, 38, корп. 9
8 (8652) 316-847 (контактный телефон)
Обособленное структурное подразделение на ул. Чехова, 77 :
355000, г. Ставрополь, ул. Чехова, 77
8(8652) 951-943 (контактный телефон)
Обособленное структурное подразделение в г. Михайловске:
358000, г. Михайловск, ул. Ленина, 201 (в новом жилом районе «Акварель»).
8(988) 099-15-55 (контактный телефон)
